一、溶解酶为何出现酶活性低现象?
1)运输过程中酶已失活;
2)没有充分摇匀;
3)配制过程中试剂、蒸馏水、移液管被污染或没有洗净;
4)操作不当,导致酶失活;
5)培养时间较短;
6)培养温度较低;
7)配置好的试剂保存温度过高,使酶失活
二、食品安全测试过程中需要注意哪些问题?
1)在检测过程中反应瓶、微量移液器、移液管等要洗干净;特别是用完后立即清洗,放在无污染的地方晾干(如滤纸上、移液管架上等);
2)不同试剂使用不同的器具,坚持器具专用,并贴上专用标签;
3)酶、显色剂、底物的加入量要准确,加后要摇匀;
4)用手抓比色皿的磨砂面,放进仪器比色槽时,应将透光面对应光路方向,让光路通过比色皿的透光面;
5)操作要尽量快。因为酶抑制率检测的关键就是抑制率与反应时间的关系,对照测量和样品测量操作时间不一致,也会造成检测结果不准确;
6)加入酶试剂以前一定要把培养池温度加热到37℃,以保证加完酶液和显色剂后能立即把反映瓶放入培养池,切记不能加完试剂后再等升温;
7)在使用移液枪吸取溶液时,按压要适度,切忌一下按到底,并且吸头要及时清洗。
三、农药残留检测仪其他注意事项
1.样品测试的最后一道程序,即加底物后,应马上摇匀,放入测定仪,否则影响数据准确性。经实践,在菠菜样品的测试中,立刻放入的抑制率为21.4%,1分钟后放入的51.7%,可见,加试剂后放入时间的长短可影响其准确性。
2.磷酸盐缓冲液的配置一定要用蒸馏水或纯净水或矿泉水,否则影响准确性。
3.生化检测法只是定性检测法,只能检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留,不适用于其它类型农药的检测。
4.韭菜、芹菜、蒜、葱及茄汁液中含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。因此.,处理这类样品时,可采取整株蔬菜浸出提取液的方法(不要搞烂样品)。对叶绿素含量较高的蔬菜,也可采取类似方法。
5.试剂从试剂瓶吸出后,不能再放回瓶中,坚持只吸不进的原则,防止试剂污染。
6.酶试剂及底物要在0~5℃温度条件下保存,以确保酶的活性,因此,应在冰箱中保存,但不能冻至结冰。
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